Ứng dụng này chứng minh việc sử dụng Giải pháp toàn diện của Agilent dMRM để sàng lọc đa dư lượng Thuốc thú y trong nền mẫu thủy sản. Hiệu suất định lượng đối với 210 loại thuốc thú y đã được đánh giá trong nền tôm và cá hồi. Các điều kiện thử nghiệm quy trình làm việc bao gồm chuẩn bị mẫu, tách sắc ký, phát hiện trên MS và xử lý dữ liệu, cùng với bộ kit hóa chất cung cấp giải pháp toàn diện dMRM cho phân tích đa dư lượng thuốc thú y .Hiệu suất của phương pháp được đánh giá dựa trên giới hạn phát hiện [LOD], giới hạn định lượng [LOQ], độ tuyến tính của đường chuẩn, độ chính xác, độ chụm và độ thu hồi. Độ nhạy của phương pháp được thiết lập bằng cách sử dụng các chuẩn trên nền mẫu trong phạm vi từ 0,1 đến 100 μg / kg. Tất cả các chất phân tích đều cho thấy độ tuyến tính của R2> 0,99 với các đường chuẩn được xây dựng từ LOQ đến 100 μg / kg. % RSD của tín hiệu đáp ứng là 10 đối với LOQ, sử dụng chiều cao peak cho tín hiệu và thuật toán RMS tự động để tính nhiễu, có trong phần mềm Phân tích Định lượng Agilent’s MassHunter. Để xác định LOQ, một đánh giá bổ sung như độ chọn lọc đối với chất phân tích xét cho từng nền mẫu và độ tái lập tín hiệu đáp ứng của chất phân tích cũng được xem xét. Việc tính toán LOD và LOQ chỉ dựa trên S / N có thể bị ảnh hưởng nếu có sự đóng góp của nền mẫu do sự hiện diện của các chất phân tích trong nền mẫu hoặc ảnh hưởng nền mẫu. Khi có sự đóng góp từ nền mẫu vào chất phân tích, LOD được định nghĩa là diện tích peak gấp ba lần phần thêm vào của nền mẫu và LOQ diện tích peak gấp năm lần phần thêm vào của nền mẫu. Độ tái lập tín hiệu đáp ứng của chất phân tích được tính toán từ ba lần tiêm lặp lại là một yếu tố quan trọng khác được xem xét đối với LOQ, và% RSD nhỏ hơn tiêu chí chấp nhận điển hình là 20%. Điểm chuẩn thấp nhất tương ứng với 0,1 μg / kg, thấp hơn đáng kể so với yêu cầu MRLs theo quy định [≥10 μg / kg] đối với hầu hết các loại thuốc thú y trong thủy sản. Ngoài ra, cường độ tín hiệu của nhiều cặp MRM của chất phân tích cho thấy tiềm năng đạt đến LOD và LOQ thấp hơn.
Đường chuẩn cho từng chất phân tích mục tiêu được tạo bằng cách sử dụng các dung dịch chuẩn có nền mẫu bắt đầu từ LOQ xác định đến mức thêm chuẩn cao nhất. Ví dụ, đối với chất phân tích mục tiêu có LOD ở 0,1 μg / kg, đường chuẩn được xây dựng từ 0,25 đến 100 μg / kg; đối với chỉ tiêu có LOD ở 1 μg / kg, khoảng đường chuẩn là 2,5 đến 100 μg / kg; và đối với chỉ tiêu có LOD ở 10 μg / kg, khoảng đường chuẩn là 25 đến 100 μg / kg. Mô hình hồi quy được sử dụng trong nghiên cứu này là tuyến tính không qua gốc tọa độ và trọng số 1/x. Tất cả các chất phân tích mục tiêu đều đáp ứng yêu cầu về độ tuyến tính của đường chuẩn là R2> 0,99. Bảng 1 cho thấy dữ liệu LOD, LOQ và đường chuẩn của tất cả các chất phân tích mục tiêu trên tôm.
Độ chính xác và độ chụm của thiết bị
Giá trị độ chính xác trung bình cho mỗi điểm chuẩn có nền mẫu được tính toán từ dữ liệu ba lần tiêm. Các giá trị chính xác trung bình cho tất cả chỉ tiêu nằm trong khoảng 70 đến 120%.
Độ chụm được xác định bằng cách tính toán% RSD của tín hiệu đáp ứng của chất phân tích và thời gian lưu [RT] bằng cách sử dụng dữ liệu ba lần tiêm lặp cho các điểm chuẩn có nền mẫu. Độ chụm tốt đạt được xét về tín hiệu đáp ứng và thời gian lưu tốt đối với tất cả các chất phân tích trong cả hai nền mẫu
Ví dụ,% RSD của tín hiệu đáp ứng cho tất cả các chỉ tiêu ở tôm ở nồng độ 25 μg / kg là